技術文章
蛋白酶K在具體實驗中的應用點擊次數(shù)：1303 更新時間：2020-12-24
蛋白酶K經(jīng)純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩(wěn)定，還具有降解天然蛋白質(zhì)的能力，因而它應用很廣泛，包括制備脈沖電泳的染色體 DNA，蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作濃度是50—100μg/ml。在較廣的pH范圍內(nèi)(pH 4-12.5)均有活性。
蛋白酶K配制標準：20mg/ml蛋白酶K配制標準(proteinase K)：將200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中，輕輕搖動，直至蛋白酶K*溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。
酶解與核酸結(jié)合的組蛋白，使 DNA游離在溶液中，隨后用不同方法進行 抽提，除去雜質(zhì)，收集DNA。EDTA等螯 合劑或SDS等去垢劑均不能使之失活。蛋 白酶K貯存液一般為10mg/ml或20mg/ml。 貯存于一20°C。蛋白酶K溶液為無色透明， 如出現(xiàn)沉淀就不能再使用。
蛋白酶K在原位雜交技術中通常用于雜交前的處理，它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用，以增加探針與靶核酸結(jié)合的機會，提高雜交信號.但蛋白酶K的濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時，都會對細胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞，導致組織切片的脫落，細胞核的消失，從而影響雜交結(jié)果.EDTA緩沖液可以替代蛋白酶K的作用，解決上述出現(xiàn)的問題，并能達到理想的染色效果。
產(chǎn)品搜索
請輸入產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品分類
聯(lián)系我們
公司名稱：上海嶸崴達實業(yè)有限公司
地址:上海市青浦重固大街588號512室
郵編：201100
電話：021-64133189
手機: 13788995069
聯(lián)系人: 陳
傳真：021-64129208
E-mail: lucy@runwelltac.com
地址:上海市青浦重固大街588號512室
郵編：201100
電話：021-64133189
手機: 13788995069
聯(lián)系人: 陳
傳真：021-64129208
E-mail: lucy@runwelltac.com
|
|||||
|
|||||
 |
